浮游菌采樣器是一種多孔吸入式塵菌采樣器。它根據(jù)顆粒撞擊原理和等速采樣理論設(shè)計(jì),采樣直接,采樣口風(fēng)速與潔凈室內(nèi)風(fēng)速基本一致,能更準(zhǔn)確地反映潔凈室內(nèi)的微生物濃度。采樣時(shí),帶塵菌空氣高速通過微孔,被撞擊在培養(yǎng)皿內(nèi)的瓊脂表面;這些活體微生物在培養(yǎng)過程中,發(fā)生動(dòng)態(tài)再水化過程,高速生長,從而更快得出結(jié)果。
浮游菌采樣器的測試流程:
·測試方法
1 方法提要
本方法采用計(jì)數(shù)濃度法,即通過收集懸游在空氣中的性粒子于專門的培養(yǎng)基,經(jīng)若干時(shí)間,在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微數(shù),以此來評定潔凈室(區(qū))的潔凈度。
2 所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基
a)浮游菌采樣器;
b)真空抽氣泵;
c)培養(yǎng)皿;
d)培養(yǎng)基;
e)恒溫培養(yǎng)箱。
3 浮游菌采樣器
浮游菌采樣器宜采用撞擊法機(jī)理的采樣器,一般采用狹縫式采樣器或離心式采樣器。
3.1 采用的浮游菌采樣器須要有流量計(jì)和定時(shí)器。
3.2 狹縫式采樣器的原理
狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣,通過采樣器的縫隙式平板,將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉(zhuǎn)的平板培養(yǎng)基表面上,附著的活微粒子經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落,予以計(jì)數(shù)。
3.3 離心式采樣器的原理
離心式采樣器由于內(nèi)部風(fēng)機(jī)的高速旋轉(zhuǎn),氣流從采樣器前部吸入從后部流出,在離心力的作用下,空氣中的活微粒子有足夠的時(shí)間撞擊到專用的固形培養(yǎng)條上,經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落,予以計(jì)數(shù)。
3.4 狹縫式采樣器的使用要點(diǎn)
應(yīng)嚴(yán)格按儀器說明書的要求進(jìn)行操作。
3.4.1 校驗(yàn)
采樣器須按儀器的檢定周期,定期對儀器作檢定,以保證測試數(shù)據(jù)的可靠性。校驗(yàn)的項(xiàng)目有:定時(shí)器、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速、流量計(jì)。
每次測試前應(yīng)按說明書上的規(guī)定,先接通電源,啟動(dòng)真空抽氣泵,然后調(diào)節(jié)流量計(jì)及定時(shí)器。
空氣采樣量根據(jù)需要選定。已知采樣器的流量(L/min),設(shè)定采樣時(shí)間(min),兩者相乘即采樣量(L)。
4 注意事項(xiàng)
4.1 采樣口須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造。
4.2 采樣管嚴(yán)禁滲漏,內(nèi)壁應(yīng)光滑。
4.3 采樣管的長度應(yīng)根據(jù)測點(diǎn)的高度定,盡量減少彎曲。
4.4 真空抽氣泵
真空抽氣泵的排氣量應(yīng)與采樣器匹配。
宜采用無油真空抽氣泵,必要時(shí)可在非氣口安裝氣體過濾器。
真空抽氣泵安裝的位置須適當(dāng),一般裝在采樣器下面。
4.5 培養(yǎng)皿
狹縫式采樣器一般采用? 150mm×15mm、? 90mm×15mm、?65mm×15mm三種規(guī)格的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿??筛鶕?jù)所選用采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。
離心式采樣器采用專用的固形培養(yǎng)條。
4.6 培養(yǎng)基
普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認(rèn)可的培養(yǎng)基。其配制方法見附錄A(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)。
4.7 恒溫培養(yǎng)箱
須定期對培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。
4.8 測試步驟
測試前儀器、培養(yǎng)皿表面須嚴(yán)格消毒。
采樣器進(jìn)入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌,用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)。
用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
采樣前,先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面,采樣結(jié)束,再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。
采樣口及采樣管,使用前須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時(shí),應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。
采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服,在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前,雙手用消毒劑消毒。
狹縫式采樣器的采樣程序
儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿,開動(dòng)真空泵抽氣,使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā),時(shí)間不少于5min,并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。
關(guān)閉真空泵,放入培養(yǎng)皿,蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。
置采樣口于采樣點(diǎn)后,依次開啟采樣器、真空泵,轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器,根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。
培養(yǎng)
全部采樣結(jié)束后,將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
在30℃~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),時(shí)間不少于48h。
每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn),檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染??擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。
菌落計(jì)數(shù)
用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì),然后用5~10倍放大鏡檢查,有否遺漏。
若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊,可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。
注意事項(xiàng)
使用前仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量,培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。
采取一切措施防止采樣管的污染和其他為對樣本的污染。
對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。
由于細(xì)菌種類繁多,差別甚大,計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察,不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別,必要時(shí)用顯微鏡鑒別。
浮游菌采樣器用于制藥GMP廠房、乳制品廠房、醫(yī)院手術(shù)室、生物潔凈、發(fā)酵工業(yè)等潔凈室和無菌環(huán)境中的空氣微生物檢測以及有關(guān)研究教學(xué)部門作空氣微生物的采樣研究。